單克隆抗體，你可能已經了解關于它的諸多信息，也可能在研究中經常使用。1975年，Kohler和Milstein開創了經典的雜交瘤技術，生產單抗。用您需要產生抗體的物質（抗原）免疫小鼠，然后獲取小鼠的脾細胞并與特殊的骨髓瘤細胞融合，使其變成永生化的雜交瘤細胞，可分泌產生抗體。目前，這項技術仍然被用于生產具有精確特異性和無限量的單抗。盡管它有這些吸引人的功能，但用這種方法生產的單抗仍具有一些不可忽視的缺陷。對此，幸運的是，重組抗體的到來改變了原有單抗生產的世界，并克服了相應的缺陷，為什么會這樣？請繼續閱讀吧！
通常，對于研究人員來說，確定哪種抗體適合您的研究是項目啟動的第一步。有許多因素需要考慮，包括需要抗體量，抗體的應用和對抗體特異性的要求。單抗和多抗有著各自的優缺點和適用性，在選擇時，除了要考慮抗體的應用之外，還要考慮宿主是否適合。
首先，什么是重組抗體？
以編碼抗體的基因作為起始材料，利用重組DNA技術，在體外生產的抗體，
超出了免疫系統的限制。通過獲得抗體的基因序列，構建表達載體，并將其轉入至表達宿主中（如酵母、哺乳動物細胞或細菌中）。利用這種方式，生產的抗體是特定種類（IgG/IgA/IgE/IgD/IgM)的抗體。同時，不僅可以生產全長抗體，也可以生產各類抗體片段，如scFv,Fab等。
那么，重組抗體克服了雜交瘤單抗的哪些缺點？
- 時間上：重組抗體只需數周（少至4周）；而雜交瘤單抗至少數月（少至4月）
- 成本上：重組抗體經濟高效，尤為適合高通量生產抗體；而雜交瘤長期大量生產抗體成本相當昂貴
- 批間差：重組抗體由編碼它的基因決定，更可靠，具有高度的批次間一致性；而雜交瘤穩定性差，批次間不具備一致性
- 穩定性：雜交瘤細胞可能會丟失，重新制備耗時耗力。而對于重組抗體來說，你需要的只是一個蛋白表達平臺
- 應用上：重組抗體可規避鼠單抗引發的人體免疫反應。即使是人源化的雜交瘤抗體，也會被人體的免疫系統判定是外來的，會引起超敏反應
- 生產能力：重組抗體不僅可以生產全長抗體，也可生產Fab/scFv/sdAb等抗體片段，且易在多種宿主中表達
- 抗體工程：重組抗體可通過抗體工程技術改造，例如提高抗體親和力，抗體人源化等
- 抗體片段：重組抗體可以以多種形式產生，如Fab片段，scFv單鏈抗體，sdAb單域抗體等
- 動物福利：重組抗體不需要使用動物，克服了對動物的倫理問題
- 純化：重組抗體純化需要的抗原更少
如何開發重組抗體？
對于重組抗體的開發，一般有幾種方法：通過噬菌體展示，B細胞克隆及雜交瘤測序。
噬菌體展示技術
噬菌體展示技術是將單鏈抗體（scFv）或抗原結合片段（Fab）展示于噬菌體表面，并構建數百萬甚至數十億個展示出抗體片段的噬菌體，從而建立起一個抗體文庫（Antibody library）。得到一個數以千計的噬菌體文庫，每個噬菌體攜帶不同的抗體，如何才能篩出那個展示你想要抗體的噬菌體呢？這就是通過淘選，經過數輪的“吸附-洗脫-擴增”，最終分離出具有最高親和力和穩定性的展示抗體的噬菌體。對所選的抗體進行測序，再利用重組技術即可大量生產。銘研可以提供重組抗體的生產，詳情可與我們聯系。
B細胞克隆
通過免疫動物，分離獲得漿細胞，使用流式細胞術將它們彼此分離。 篩選分離的細胞以找到產生所需抗體的克隆，并擴增克隆的基因，克隆到表達載體中，通過ELISA篩選表達較好的克隆。 然后進行測序，利用體外重組技術生產抗體。
雜交瘤測序
通過對已有的雜交瘤細胞測序，獲得抗體的基因序列，即可利用體外重組技術表達抗體。
一旦開發出重組抗體，即可快速大量生產，并且具有比普通單抗/多抗更好的結合活性。雖然這些開發過程非常復雜，耗時且，但是如果您在長期內需要多次使用（比如IVD抗體開發），你會發現，它具有極大的成本效益，一次開發，終身受益！