雙特異性抗體（Bispecific antibody，BsAb）又稱雙功能抗體，是基因工程抗體的一種，具有兩個不同的抗原結合位點，可同時結合兩個靶抗原。雙特異性抗體在發揮抗體導向性功能的同時，還能介導另一種特殊作用，如一個結合靶細胞上的特異性抗原，另一個結合淋巴細胞或者吞噬細胞，從而導致效應細胞可靶向殺死腫瘤細胞。

雙特異性抗體的優點

• 可以同時識別兩種抗原分子，提高了抗體的選擇性和功能性親和力，改善了藥物的安全性和有效性。
• 與兩種單抗藥物聯合用藥的治療方法相比，雙特異性抗體藥物減少了開發和臨床試驗的成本。
• 雙特異性抗體還具有特異性高、靶向性強、用量少及毒副作用小的優點。

雙特異性抗體的制備方法

化學交聯法

化學交聯法是通過交聯劑（常用交聯劑包括SPDP、DTNB、OPDM）的介導，在體外將兩種不同的抗體“半分子”借助二硫鍵或硫醚鍵交聯制備而獲得雙特異性抗體。

局限性：這種制備方法的潛在毒性尚無定論，所以尚未應用于臨床當中。

雜交-雜交瘤法

雜交-雜交瘤法是通過將分泌兩種不同單克隆抗體的雜交瘤細胞，或是將一種雜交瘤細胞和一種抗體的脾細胞再次融合，制備新的雜交瘤。這些融合后的雜交瘤分泌產物中就含有部分雙特異性抗體，并且這些產物與天然抗體分子幾乎完全相同。

局限性：操作難度大、融合后的雜交瘤極不穩定、產物產率低且分離困難等等。

基因工程法

利用基因工程技術制備雙特異性抗體是目前最常用的方法，以抗原結合片段如Fab、Fv或ScFv為構件設計制備的BsAb，具有分子量小、組織穿透力強、易于清除的特點，并且由于缺乏恒定區，不會引起全抗體的生物學效應，減少了與表達Fc 受體的細胞發生非特異性結合的機會。

雙特異性抗體的應用

腫瘤的治療

雙特異性抗體可通過介導免疫細胞、結合放射性物質、連接毒素或化療藥物等多種方式應用于腫瘤的治療與診斷。Robert等將抗CEA和抗TNF-α的Fab ’段通過硫醚鍵連接成的雙特異性F(ab ’)₂, 在裸鼠的人腸肉瘤移植模型中 , 被證實有提高TNF在腫瘤部位的濃度, 延長其存留時間的作用。Svensson等用抗人肺腺癌細胞系H2981的F(ab ’)₂與β-內酞胺酶相連, 后者可以水解氮芥頭孢菌素, 釋放出細胞毒性增強50倍的苯二胺。

臨床診斷

由于雙特異性抗體具有高度敏感性和特異性，因此可以被用于臨床診斷。用于檢測的雙特異抗體藥物，其中的一個結合域同時與檢測病原體、病毒或腫瘤細胞結合，另一結合域同辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶結合。雙特異性抗體使檢測方法得到簡化，因此在診斷工具中具有廣闊的應用前景。

免疫分析中的應用

雙特異性抗體是設計免疫診斷試劑的良好材料。Milstein等用雜交-雜交瘤技術制備出能同時識別過氧化物酶和生長抑素的雙特異性抗體，在免疫組化中表現出了良好的應用價值。它使傳統的繁瑣的免疫組化方法得到簡化，并因雙特異性抗體的分子量遠小于常規PAP復合物，避免了背景過深的現象，并且提高了敏感性。此外，它還能與放射性免疫化學技術相結合以同時檢測雙抗原位點并進行抗原的半定量。